目前临床使用朝医经典方剂千金文武汤（《东医四象新编》）用于治疗糖尿病具有显著疗效。本文以该方剂药味中共有活性部位总黄酮的提取量为指标，优选提取工艺。
仪器与试药
756PC型紫外可见分光光度计（上海恒平）；DV114C型欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站（欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站）；芦丁（购自中药品生物制品检验所，批号：８１８－９４０１）；药材为：葛根、黄芩、山药、麦门冬、五味子、桔梗、白芷；水为纯水，其他试剂均为分析纯。
方法与结果
１．处方分析：千金文武汤处方由葛根、山药、黄芩、麦门冬、五味子、桔梗、白芷七味药组成，具有补肺敛肺、润燥化痰、生津解表的功效，主要用于太阴人下消，小便不禁等证，目前朝医临床常用其治疗ＤＭ。方中主药葛根中黄酮类成分葛根素、黄芩中黄酮类成分黄芩苷有明确
降血糖或降血脂作用。故以葛根、黄芩为主，结合其他药味，选择总黄酮为该方剂提取的指标成分。总黄酮含量测定方法学考察：采用紫外分光光度法，建立总黄酮含量的测定方法。
２．溶液的配制。
对照品溶液：用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站精密称取干燥至恒重的芦丁５．７ｍｇ，用适量水溶解后定容至１００ｍｌ，即得。样品溶液：欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站称取处方量药材，加入１２倍量水浸泡１ｈ，加热煎煮提取１ｈ，滤过，再加入１０倍量水提取１ｈ，滤过，合并滤液，定容至１ ２００ｍｌ，即得。供试品溶液：在用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站移液器精密吸取样品溶液１ｍｌ于蒸发皿中，加１ｇ聚酰胺粉吸附，于恒重干燥箱中，５０℃挥干溶剂，转入层析柱，用３０ｍｌ石油醚洗脱，弃石油醚，再用３０ｍｌ甲醇洗脱总黄酮，收集洗脱液，减压蒸干，残渣用甲醇溶液溶解并定容至２５ｍｌ即得。
３．线性关系的考察：欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站移液器精密量取对照品溶液１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０ｍｌ至１０ｍｌ容量瓶中，用水定容，在２５６ｎｍ处测定吸光度。以吸光度值（Ｙ）对浓度（Ｘ）进行回归，得到其回归方程。结果表明，对照品溶液浓度与吸光度值呈良好的线性关系。
４．精密度考察：用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站移液器精密量取上述对照品溶液，重复测定５次，ＲＳＤ为０．７７％，表明仪器精密度良好。
５．稳定性考察：用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站移液器精密量取同一供试品溶液，分别于０、２、４、８、１２、２４ｈ进行测定，ＲＳＤ为０．９１％，表明供试品溶液在２４ｈ内稳定。
６．重现性考察：用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站精密称取同一批样品溶液５份，按供试品溶液项下制备，按上述方法测定，ＲＳＤ 为０．９５％，表明本法重现性良好。
７．加样回收率考察：用欧洲杯竞猜官网(中国区)官方网站移液器精密量取已知含量的样品溶液共６份，分别精密加入对照品适量，按供试品溶液项下制备，测定，计算回收率。本法平均回收率为９７．７７％，ＲＳＤ为１．５４ ％，表明本法准确度较好，方法可行。
８．样品浓度与吸光度线性关系考察：精密量取１ｍｌ样品溶液，用蒸馏水定容至５０ｍｌ，分别精吸１、２、３、４、５ｍｌ置１０ｍｌ容量瓶中，用蒸馏水定容，在２５６ｎｍ处测吸光度值。以吸光度值（Ｙ）对浓度（Ｘ）进行回归，得其回归方程。结果表明，样品浓度与吸光度值呈良好的线性关系，表明以总黄酮含量作为样品测定指标合理、可行。
提取工艺优化
１．试验方案的设计：采用正交设计试验，以样品中总黄酮含量为评价指标，优选提取工艺。复方制剂实际生产中提取次数一般为２次，所以在提取工艺中，提取时间、溶剂用量是影响总黄酮提取量的主要因素。因此，选用Ｌ４（２２）正交设计安排实验。结果分析：以各实验组总黄酮的含量为指标进行分析。结果表明，在所选因素的水平范围内，因素Ａ（提取时间）、Ｂ（溶剂用量）对总黄酮提取量均无显著性影响。通过正交试验所得结果进行直观选择，提取工艺为Ａ２Ｂ１，即提取时间为９０ｍｉｎ／４５ｍｉｎ，溶剂用量为１２倍／１０倍。
２．验证性实验：按照上述优化提取工艺进行提取，重复进行３次平行试验，测得样品中总黄酮含量为（３．５３２±０．０５）ｍｇ／ｇ，与正交实验大值３．６３５ｍｇ／ｇ接近，表明该工艺稳定、可行。
讨论
本文采用紫外分光光度法作为千金文武汤的含量测定方法，结果平均回收率为９７．７７ ％，ＲＳＤ为１．５４％，表明此法准确、可靠，可用于总黄酮的含量测定。优化的提取工艺为：提取时间为９０ｍｉｎ／４５ｍｉｎ，溶剂用量为１２倍／１０倍。
